การแข่งขันฟุตบอลรายการ ไทยเอฟเอคัพ 2016 รอบคัดเลือก เพลย์ออฟ ก่อนการแข่งขัน รอบแรก มีทีมต้องแข่งขัน รวม 16 ทีม จับสลากการแข่งขัน 8 คู่ แข่งขันวันพุธ 18 พฤษภาคม 2559 ผลการแข่งขัน ทีมจากไทยลีกดิวิชั่น 1 ฤดูกาล 2016 จำนวน 4 ทีม สามารถเก็บชัยชนะได้ทั้งหมด ร่วมกับ 4 ทีมจาก ไทยลีกภูมิภาค ดิวิชั่น 2
ผลการแข่งขัน ไทยเอฟเอคัพ 2016 รอบคัดเลือก เพลย์ออฟ วันพุธ 18 พฤษภาคม 2559
- ยโสธร เอฟซี 0-1 สมุทรสงคราม อาร์แอร์ไลน์ เอฟซี
- บางพลับ ดอนทหารบก 0-5 สมุทรสาคร เอฟซี
- กองเรือยุทธการ 0-4 บ้านบึง ยูไนเต็ด
- อุตรดิตถ์ เอฟซี 1-2 หนองบัว พิชญ เอฟซี
- แอร์ฟอร์ซ เซ็นทรัล เอฟซี 0-0 (จุดโทษ 4-5) ปทุมธานี ยูไนเต็ด
- บีทียู ส.บุญมีฤทธิ์ 1-2 อุบล ยูเอ็มที ยูไนเต็ด
- นครปฐม ยูไนเต็ด 2-1 รังสิต เอฟซี
- พีทีที ระยอง 4-0 อยุธยา ยูไนเต็ด
ทีมจากไทยลีกดิวิชั่น 1 ที่ผ่านเข้าสู่รอบ 64 ทีม ไทยเอฟเอคัพ 2016 ได้แก่
- สมุทรสงคราม อาร์แอร์ไลน์ เอฟซี
- อุบล ยูเอ็มที ยูไนเต็ด
- นครปฐม ยูไนเต็ด
- พีทีที ระยอง
ทีมจากไทยลีกภูมิภาค ดิวิชั่น 2 ที่ผ่านเข้าสู่รอบ 64 ทีม ไทยเอฟเอคัพ 2016 ได้แก่
- บ้านบึง ยูไนเต็ด
- สมุทรสาคร เอฟซี
- หนองบัว พิชญ เอฟซี
- ปทุมธานี เอฟซี
